PROSES PENANAMAN EKSPLAN

Setelah media kultur dibiarkan selama 3 hari dan tidak menunjukkan adanya kontaminan bakteri dan jamur pada permukaan media, maka kegiatan penanaman eksplan dapat dilakukan. Eksplan sebelum ditanam pada media kultur, terlebih dahulu dilakukan sterilisasi, seperti bahasan pada bab III. Eksplan yang telah di cuci dengan air steril diletakkan dalam petridish yang didalamnya dialasi tissue steril. Fungsi tissue ini adalah sebagai penyerap air bekas bilasan, sehingga eksplan kering.

Peralatan dan bahan yang perlu disiapkan dan diletakkan di atas meja laminar adalah ; pinset, gunting, pisau scapel, botol berisi alkohol 96 %/spiritus, lampu bunsen, tissue gulung dan air steril. Peralatan dan bahan ini disemprot terlebih dahulu dengan alkohol 70 % sebelum dimasukkan ke dalam meja laminar.

1. Proses penanaman eksplan hasil inisiasi

1. Langkah awal adalah, menata peralatan dan bahan sedemikian rupa sehingga memudahkan proses penanaman. Seperti; botol media ditumpuk dan di-letakkan di sebelah kiri, petridish tepat di depan, lampu bunsen letakkan di depan sebelah kiri dari petridish, botol alkohol dan botol tempat pinset letak-kan di sebelah kanan.
2. Kemudian nyalakan lampu bunsen.
3. Semprot pinset dengan alkohol 70 % atau celupkan pada alkohol 96 % atau pada spiritus, kemudian bakar di atas lampu bunsen dari pangkal sampai ujung. Lakukan 2 – 3 kali. Langkah ini untuk memusnahkan spora jamur atau bakteri yang masih menempel pada pinset.
4. Letakkan pinset di atas petridish/botol alkohol.
5. Ambil botol media dan buka.
6. Ambil eksplan dengan pinset dan masukkan langsung ke dalam botol kultur.
7. Tutup rapat dan letakkan disebelah kanan.
8. Agar tekanan dari luar tidak masuk, tutup botol dapat dilapisi plastik klin wrap.
9. Beri label tanggal penanaman, jenis tanaman dan nama media.

2. Proses penanaman eksplan hasil multiplikasi (sub kultur)

1. Langkah awal adalah, menata peralatan dan bahan sedemikian rupa sehingga memudahkan proses penanaman. Seperti; botol media ditumpuk dan di-letakkan di sebelah kiri, petridish tepat di depan, lampu bunsen letakkan di depan sebelah kiri dari petridish, botol alkohol dan botol tempat pinset letak-kan di sebelah kanan.
2. Kemudian nyalakan lampu bunsen.
3. Semprot pinset dengan alkohol 70 % atau celupkan pada alkohol 96 % atau pada spiritus, kemudian bakar di atas lampu bunsen dari pangkal sampai ujung. Lakukan 2 – 3 kali. Langkah ini untuk memusnahkan spora jamur atau bakteri yang masih menempel pada pinset.
4. Ambil tanaman dari botol kultur yang akan di multiplikasi.
5. Letakkan tanaman di dalam petridish dan dipotong-potong dengan meng-gunakan pisau scapel atau gunting.
6. Ukuran eksplan, bisa pernodlus untuk tanaman berkayu atau pertunas.
7. Kemudian tanam kembali eksplan pada media kultur yang baru. Isi 1 botol kultur bisa 5 -10 eksplan.
8. Tutup rapat dan letakkan disebelah kanan.
9. Agar tekanan dari luar tidak masuk, tutup botol dapat dilapisi plastik klin wrap.
10. Beri label tanggal penanaman, jenis tanaman dan nama media.